pGEMX-T Easy 載體連接試劑盒產品介紹
許多高溫DNA聚合酶,如Taq DNA聚合酶、Tth DNA聚合酶等擴增的PCR產物在3’-末端后都帶有一個突出的堿基A,這樣的PCR產物可以用3’-末端后帶有一個突出堿基T的載體方便地進行克隆。傳統的pGEM-T Easy 載體使用ECOR V切開后加T而成,由于加T不完全或者T頭不穩定容易造成自連背景高和克隆效率不穩定。 pGEMX-T Easy 載體通過將傳統的pGEM-T Easy載體來源質粒ECOR V酶切位點改造為兩個連續的XCM I 酶切位點,XCM I 酶切后其多克隆位點兩側的3’末端直接產生未配對的T堿基而成,因此有更高的重組效率。同時除了對ECOR V改造外,傳統的pGEM-T Easy 載體的序列和優點完全得到保留,例如兩端獨特設計的兩個ECOR I位點使插入片段可以用廉價高效的ECOR I單酶切檢測。此外,本公司載體連接體系還有背景低(藍斑小于10%),重組率高(白斑中超過90%有插入片段),可快速連接等特點。
pGEMX-T Easy 載體連接試劑盒產品特點
1. 用于連接帶有A尾的PCR產物,進行TA克隆。
2. 可以通過藍白斑顯色進行陽性轉化子篩選。
3. 陽性克隆可以使用通用引物T7和SP6啟動子引物進行鑒定和測序。
4. 背景低(藍斑小于10%),重組率高(白斑中超過90%有插入片段)。 pGEMX-T Easy 載體連接試劑盒
產品儲存
-20 ℃ 保存,反復凍融至少10次不影響使用質量。
pGEMX-T Easy 載體連接試劑盒pGEMX-T Easy載體圖譜
pGEMX-T Easy載體啟動子和多克隆位點序列