BCA 蛋白定量試劑盒產品介紹
BCA(bicinchoninic acid)法蛋白濃度定量試劑盒是在世界上常用的蛋白濃度檢測方法之一BCA法基礎上改進而成。眾所周知,二價銅離子在堿性的條件下,可以被蛋白質還原成一價銅離子(biuret reaction),一價銅離子和獨特的BCA Solution A(含有BCA)相互作用產生敏感的顏色反應。兩分子的BCA螯合一個銅離子,形成紫色的反應復合物。該水溶性的復合物在562nm處顯示強烈的吸光性,吸光度和蛋白濃度在廣泛范圍內有良好的線性關系,因此根據吸光值可以推算出蛋白濃度。
BCA 蛋白定量試劑盒產品特點
1. 步驟簡單,45分鐘內完成測定,比經典Lowry法快4倍而且更加方便。
2. 靈敏度高,檢測濃度下限達到25μg/ml,*小檢測蛋白量達到0.5μg,待測樣品體積為1-20μl。
3. BCA法測定蛋白濃度不受絕大部分樣品中的去污劑等化學物質的影響,可以兼容樣品中高達5%的SDS,5%的Triton X-100,5%的Tween 20,
60,80。
4. 在20-2000μg/ml濃度范圍內有良好的線性關系。
5. 檢測不同蛋白質分子的變異系數遠小于考馬斯亮藍法蛋白定量。
BCA 蛋白定量試劑盒產品儲存
本產品收到后按照上面指示溫度存放各成份,至少一年內有效。蛋白標準長期保存-20℃放置,常溫運輸。
注意事項
1. 蛋白標準請在全部溶解后先混勻,再稀釋成一系列不同濃度的蛋白標準。標準品曲線配制時,如果吸量不準確或者加樣槍不**會造成標準
曲線相關系數減小,可根據需要使用倍比梯度稀釋的方法來配制,或者使用**度高的加樣槍。
2. Solution A和Solution B混合成工作液時可能會有渾濁,但充分振蕩混勻后就會消失,成為淡綠色的透明溶液。
3. 需酶標儀一臺,測定波長為540-590nm之間,562nm*佳;需96孔板。如果沒有酶標儀,也可以使用普通的分光光度計測定,但是測定蛋白濃
度時,需根據測定吸光度的杯子的體積,按比例調整A液,B液和樣品的體積。使用分光光度計測定蛋白濃度時,每個試劑盒可以測定的樣品
數量可能會顯著減少。BCA 蛋白定量試劑盒
4. BCA蛋白定量試劑盒受螯合劑和略高濃度的還原劑的影響,需確保無EGTA,EDTA低于10mM,二硫蘇糖醇低于1mM,β-巰基乙醇低于1mM。不適
用BCA法時建議使用Bradford法蛋白定量試劑盒。還可以考慮用超純水稀釋,透析/除鹽,ACETONE/TCA沉淀蛋白后重溶于超純水等方法來消
除干擾物質的影響。
5. 為了加快BCA法測定蛋白濃度的速度可以適當用微波爐加熱,但是切勿過熱。
6. 如發現樣品稀釋液或裂解液本身就有較高背景,請試用Bradford法蛋白定量試劑盒。