產品描述
分子生物學實驗中,常利用銀染的方法顯示聚丙烯酰胺凝膠或者瓊脂糖凝膠中的核酸條帶,其檢測原理是:銀離子(Ag+)可與核酸形成穩定的復合物,隨后Ag+ 在堿性環境下被還原劑如甲醛還原成銀顆粒,后者通過顯色可把核酸電泳條帶染成黑褐色。該方法檢測靈敏度比EB高達200倍,常用于檢測SSR標記、SNP標記等。
常規的銀染方法由固定、氧化、染色、顯影、終止等若干個步驟組成,操作十分繁瑣,尤其不適用于大批量實驗。而本品的推出可大大改善上述問題,主要體現在:1)超快速,整個過程僅需20分鐘;2)操作簡單,只有染色和顯影兩步;3)靈敏度跟常規方法相當,比EB高200倍,能檢測到10ng的DNA條帶。4)兩個成分都是現用現配,可重復性好。Rapid Silver Stain Kit for Nucleic Acid 快速核酸銀染試劑盒
按照本方案提供的配制方法,共可配制試劑A和試劑B分別1000ml。
產品組分
組分編號
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組分名稱
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規格
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外觀
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10801-A
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試劑A 1
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2g
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干粉
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10801-B
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試劑A 2(10×)
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100ml
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液體
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10801-C
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試劑A 3(10×)
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100ml
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液體
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10801-D
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試劑B 1(10×)
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100ml
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液體
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10801-E
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試劑B2
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5ml
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液體
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運輸與儲存
常溫運輸和保存即可。有效期1年。Rapid Silver Stain Kit for Nucleic Acid 快速核酸銀染試劑盒
注意事項
1)為了您的**和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
2)銀染主要出現在PAGE膠的表面,因此該方法更適合用于薄膠(0.5-0.75mm)的檢測。
3)染色過程中,緩慢的振蕩是必要的,一般選擇40-60 rpm。
4)凝膠表面的裂紋多是由于壓力、手印及表面干燥所致,所以全程操作中都應帶手套。
5)PAGE凝膠背景呈均一的黑色多是水中的雜質引起的,所以溶液的配制應使用電導率小于1 μS的去離子水。
6) 如果染色后有呈灰塵或煙霧狀灰色或棕色的沉淀出現在凝膠表面,可能是幾步漂洗過程不夠徹底,或染色過程溫度太低。
7)較深的銀染背景多是丙烯酰胺中的雜質所致。Rapid Silver Stain Kit for Nucleic Acid 快速核酸銀染試劑盒
8)室溫操作時,溫度的波動往往會干擾銀染的效果,恒溫水浴可以解決這個問題。
9)染色使用的玻璃器皿必須非常干凈,用酸浸泡可以滿足要求。
10)銀染應盡快照相,隨著時間延長,蛋白條帶會變淺,而背景會加深。
11)影響硝酸銀染色效果的因素很多,其使用容器的材質也是一個非常重要的因素。通常玻璃平皿是*理想的銀染容器,其化學性質極其穩定,幾乎不與銀染試劑中的任何成分發生反應,且不具有吸附染料的特性。其次是醫用搪瓷盤,瓷釉為無機玻璃質材料,能耐各種濃度的無機酸(包括強氧化性酸)、有機酸、弱堿和強有機溶劑,但不耐酸、堿介質交替使用,而常規銀染法就是酸堿介質交替使用,因此搪瓷盤銀染效果不如玻璃平皿。塑料種類較多,如果塑料是由含氨基官能團的有機物(脲、三聚氰胺或苯代三聚氰胺)與醛類(主要是甲醛)化合物經縮聚反應而得,則這種塑料會在堿性溶液中與有強還原作用的甲醛發生反應,進而使甲醛消耗,減弱銀離子與蛋白的結合,降低顯色敏感度和顯色速度。Rapid Silver Stain Kit for Nucleic Acid 快速核酸銀染試劑盒